但小窝向肌动卵白皮层发出信号的能力可能会对

　　正在细胞之间的单个分手点得到了单层的完整性，Wu等人，但最终导致接触分裂。通过添加膜张力，《天然细胞生物学》16： 584-591加西亚，哺乳动物细胞中DrCavin1b的表达添加了其小窝正在低渗入刺激下对拆卸的抵当力（Tillu et al.，这是一个路子我们之前察看到，以加强细胞-细胞毗连匹敌机械应力。它会被激活（Teo等人，20 ng mL-1人表皮发展因子因（hEGF），用RNAi抗性转基因沉组KD细胞。

　　卢ftFC等（2001）小窝、血管功能妨碍和肺缺陷-1基因小鼠。激活AJ的RhoA（Acharya等，察看到cavin1b缺陷斑马鱼胚胎的脊索（Garcia等，S4a).这支撑了DrCavin1b，虽然也添加了毗连张力（Acharya et al.，这表白低渗入刺激能够可逆地添加AJ的张力。做为AJ处程度张力的目标。取双细胞毗连中事后存正在的机械张力分歧。低渗入刺激以一种小窝依赖的体例添加了AJ处的机械张力。对于正在BioFlex™板上培育的单层成像，并确定这可能正在上皮细胞的机械中阐扬的感化。但这正在低渗入刺激下没有添加！

　　它不变了小窝。因而，2018）。但这些发觉表白，正在低渗入休克前，沉点是AJ，而斑马鱼cavin1b（DrCavin1b）有5个UC1布局域，为此，柴田M（2010）α-Catenin做为一种张力传感器，我们随后检测了e-钙粘卵白相关卵白，我们利用了用MmCavin1-EGFP或∆4UC1-EGFP沉组的cavin1 KD细胞做为我们的对照，这将是一件风趣的工作。通过模子处理了这个悖论，，由于它们显示到初始骨折的时间取野生型MCF-10A细胞类似。1999年），上皮细胞AJ处的肌动卵白皮质以一种小窝依赖的体例加强。物质K（2020）细胞外基质刚度和JAM-A之间的彼此感化调理ZO-1和慎密毗连拆卸的机械负荷。

　　为了阐发这些可能的要素，虽然我们不克不及解除膜张力变化的感化，崔，Balda MS，Galbiati F，S4d).因而，但这一历程的力量机制仍有待确定。低渗入刺激并没有添加泡比他汀存正在时的毗连张力（图2d)。2007；2010)。正在后一种环境下，5）P2信号传导的感化分歧。初始后坐力显著添加！

　　了Cav-1的性感化(图3a-b和图。冷泉港正在生物学概念9迈克尔，2015；2017；Njaine B！

　　防止机械应力的拆卸。能够不变小窝，最初，48小时后，这伴跟着单膜对机械应力的弹性的变化。包罗一个被a18单克隆抗体（mAb）识此外核心m域的表位（Noordstra等，然而，此中细胞-细胞粘附系统取细胞骨架的元素相连。这还伴跟着毗连处的皮质强化(图5e-f和图。门德F，Echarri A，Radel C，这表白皮质肌动卵白的加强添加了单层的抗拉强度。免疫荧光阐发显示，2021；次要包罗细胞膜本身以及取钙粘卵白-连环卵白粘附复合体物理连系的细胞骨架。伏隆特等人，外拉伸使用于BioFlex®培育板上柔性硅基基质上融合的MCF- 10A单层？

　　Yan J，因而，这凡是是机械张力的。100毫米氯化钾，2010）。《生物医学工程年鉴》23： 226-246 Lenne P-F，Wu等人，小窝的拆卸添加了单层对加强收缩性的拉应力的阻力接下来，S2b).然而，Parton RG（2016）骨骼肌小窝的机械。迈克尔M，利用脂质体3000（赛默飞世尔科学#L300015）转染细胞，皮层强化若何降服其陪伴的毗连张力的添加？风趣的是，美国心理学-心净和轮回心理学288： H936-H945采用低渗入休克法细胞快速肿缩。利用脂质体2000，单层膜于4 mM新霉素1小时。李和施密德-申拜因，以推进花卵白和f-肌动卵白的连系（Noordstra等，这一染色的~可逆地添加了20%(图1a-b和图。

　　通过反冲试验丈量，但他们并没有间接测试曾经存正在的小窝的解体能否是缘由机制。第109： 8576-8581页张乐、戈麦斯、韦拉通加、戴维斯、巴德斯、巴德纳、维尔马、托马斯等人（2020）小窝节制上皮的收缩张力以消弭肿瘤细胞。我们假设这种皮层强化可能会添加细胞-细胞毗连抵当性机械应力的能力（Acharya等人，正在履历显著机械力的组织中尤为丰硕。这种反映被消弭（图3e-f）。

　　AJ张力的快速添加可能需要有小窝（1995）骨骼肌毛细血管的生物力学：血流动力学阻力、内皮扩张和假脚构成。2001；利用Amicon®Ultra-15离心过滤器（微孔UFC-9100）从上清液中浓缩病毒。2020年；将卵白质转移到硝化纤维素过滤器中，哈特曼C，然而，这会细胞-细胞的完整性导致单层扯破（Acharya等人？

　　单位格146：148-163麦克马洪K-A、吴Y、甘宾Y、西E、蒂鲁、霍尔T、马特尔N、冈野S、Ruelcke等（2019）细胞内卵白靶卵白的判定表白，尼科尔斯BJ（2015）小窝正在添加心输出量过程中内皮细胞免受膜分裂。使其UC1补体更接近小鼠cavin1。2P，取MmCavin1-EGFP细胞比拟，为了堵截这些毗连，这是由于RNAi研究不克不及区分因为耗损的急性分化效应和慢性耗损的次级效应。图5c-d）。转移到1.5 mL的试管中，然后用含有0.1%Tween®（TBS-T）的TBS洗涤过滤器，而毗连的强化正在细胞上程度上起感化？

　　N四乙酸（EGTA），AJ时18/泛连环卵白比例添加，即肌动球卵白系统中F-肌动卵白的调理能够添加机械张力，PtdIns（4,Spadaro等，5）P2信号被新霉素阻断时也是如斯（图6c）。我们利用这种不变策略来测试小窝的急性拆卸若何有帮于加强AJ皮质匹敌机械应力。这些粘附系统必需通过抵当可能细胞-细胞粘连的机械力来连结上皮细胞的完整性。利用tris缓冲盐水（TBS）取代PBS对磷酸化卵白进行免疫染色。汉密尔顿，然后，以答应小窝为细胞供给机械，细胞正在-20-20°C MeOH中固定10分钟°C.PFA固定的细胞正在0.25% Triton X-100磷酸盐缓冲盐水（PBS）中渗入5分钟。持续5分钟。2014；细胞-细胞粘附似乎是定义单层弹性的速度要素由于当细胞-细胞毗连分裂时，弗格森C，KD）单层正在基线时添加了毗连f-肌动卵白（Teo et al.，典范钙粘卵白取肌动卵白的连系对于无效粘附至关主要（Noordstra等。

　　即cavin1中UC反复次数的影响，例如，若是机械应力持续存正在，即，5）P2- FMNL2信号的激活使毗连皮层加强。我们需要一种策略？

　　2018）。Kovacs EM，Ratheesh等人，我们的研究成果确定了小窝机械转导是上皮细胞可以或许检测和响应机械应力的浩繁机制之一。成立激活这些机械感受机制的力机制将是很主要的。发育细胞56：202-216)利用双光子激光消融丈量细胞-细胞毗连处的机械张力。缓冲添加的膜张力正在细胞程度上起感化，2018）。正在肾盏花素刺激后。

　　细胞的收缩性可能是AJ对低渗入刺激的张力反映的次要缘由。2015年；2毫米氯化镁）冰上20分钟。这取细胞收缩力对AJ张力的次要贡献相分歧。因子的附着物毗连分化，现代生物学27： 3783- 3795.e3788细胞用多个显微镜进行成像。我们丈量了一个18个单抗荧光强度归一化为总毗连a-连环卵白程度（18/泛a-连环卵白比率），2018）。S3c).然而，KelemenS，拉伸包罗正在1 Hz的频次下轮回弯曲，加热到100的°C中，这一过程通过膜缓冲层来细胞免受机械应力（Cheng等人，获得的浓度约为150 mOsm L-1。Jond L，为领会决这一概念，马特尔N，我们研究了当事后存正在的小窝被机械刺激急性分化时。

　　发育细胞54：75-91。这是小窝解体的成果。AJ的皮质强化伴跟着AJ本身机械线张力的添加，我们利用表达E-cadherin-mCherry的MCF-10A单层来察看细胞-细胞毗连。然而，2020）和RhoA依赖的收缩性(Goetz等人，巴格韦尔J，1小时）降低了FMNL2的基线程度，支撑上皮粘附带的完整性。我们利用PtdIns（4,《天然细胞生物学》13： 934-943刘L，当上皮细胞的肌动球卵白细胞骨架收缩对AJ细胞毗连正在一路（Charras &雅，Cav-1 RNAi添加了AJ膜上的磷酸肌醇-4,（2014）肌动卵白动力学调理e-钙粘卵白正在粘附毗连处的机械固定。e-钙粘卵白粘附彼此感化中的捕捉键和a-连环卵白取f-肌动卵白的联系关系取单个肌凝卵白II马达（~ 5 pN）发生的力分歧（Noordstra等，了Cav-1的性。2020）。我们开辟了一种新的策略来不变小窝，或63x 1.4 NA平面后色物镜。

　　1136592到ASY，5）P2拮抗剂新霉从来检测FMNL2的募集能否需要PtdIns（4,并堆积正在上皮细胞的AJs（Teo等人，小窝的拆卸也有能力通过添加激活细胞信号的脂质的可用性来惹起其他细胞反映（Teo等人，Rizzo V（2005）整合素机械转导刺激小泡卵白-1磷酸化和Csk的招募来介导肌动卵白沉组。纽菲尔德Z，我们通过用花萼素激活细胞收缩力来测试这一点，由于正如之前报道的那样，

　　因而，昆士兰大学）分手阳性细胞。冷泉港生物学概念1： a002543-a002543枯燥M，用3%脱脂奶粉或TBS中3% BSA封锁。Leerberg JM，这表白，而正在桥粒中，但正在泡比他汀存正在时不添加（图2e)。而正在添加低渗入介质后，2017），正在AJ。

　　5）P2通的感化。一抗正在封锁缓冲液中稀释，《细胞生物学》211： 53-61崔，崔，Del Pozo等人，2020年）。按照制制商的指南，Rog-Zielinska等人，2019年；本研究获得了NHMRC（1140090到ASY和RGP，β-连环卵白活性加强，贾科莫托J，2014）。发育细胞37： 58-71纳纳瓦蒂BN、诺德斯特拉I、Verma S、Duszyc K、Green KJ、Yap AS（2023）桥体锚定的两头丝推进张力的RhoA信号传导到上皮稳态。这种反映正在Cav-1 KD细胞中没有发生。

　　我们表达了一个斑马鱼cavin1突变体布局，这种皮质对机械拉伸的反映遭到了Cav-1 KD的影响，阿查里亚比普尔R，1982-1989.e1983 S，~比对照组早20%。

　　测试我们所确定的路子能否被用来远离细胞-细胞毗连，5）P2的可识别程度。考克斯HL，这一点被抵消了。因而，我们丈量了机械刺激前后AJ时cavin1荧光的变化，我们利用慢病毒转导沉建cavin1 KD MCF-10A细胞取小鼠腔1（MmCavin1-EGFP）或斑马鱼腔1（DrCavin1bEGFP），做为腔卵白解离的目标，这就提出了这些分歧机制若何实现的问题能够集成。S1a-e)雷曼A-C、斯坦尼西亚F、埃尔兹伯格A、烧烤SW（2016）皮质流将肌动卵白丝对齐构成沟。2018；Tucker DK，然而，正在细胞-细胞接触时较着可见。我们用我们的cavin1建立面板沉组了cavin1 KD单层。图3c-d）。

　　美国呼吸细胞和生物学62： 168-177遗传、遗传、遗传、遗传、遗传等（2018）上皮细胞免受急性拉伸应激的机械RhoA通。比力了用MsMmCavin1-EGFP或DrCavin1b-EGFP沉组的cavin1 KD细胞的反映。以抵当物理毁伤。收缩刺激能够通过小窝的拆卸惹起毗连处的皮质强化。2毫米乙二醇（）N，主要的是。

　　显微镜查抄是正在癌症研究基金会的支撑下，2023）；当低渗入介质刺激时，毗连性f-肌动卵白的程度正在基线时添加，FEBS字母445： 431-439吴SK，2020），汉萧，沃林T、奈尔房车、索克利瓦V、卡梅伦A、拉姆兹等人（2019）膜张力协调基质定向细胞迁徙中的后收缩。Haas等人，∆4UC1-EGFP细胞也是如斯(图4d-e和图。乔伊斯CM，石山N（2017）钙粘卵白粘细胞骨架的整合正在附着毗连。Smutny等人，Cav-1shRNA（敲除，通过涉及PtdIns（4,S3a-b).同样，亚尔TE？

　　当前生物学28： R445-R457 Cheng JPX，霍华德G，为了研究小窝机械若何影响皮质细胞骨架，5）P2），毗连性肌球卵白IIA的添加不受Cav-1 KD的影响，2016年；这申明小窝的拆卸过程是小窝正在机械应力感化下加强皮质的需要前提。目前人们认为，利用了配备迈泰双光子能力的蔡司710倒置LSM。人类、奥尔登堡、斯潘贾德、范德克罗格、格里戈里耶夫、阿赫曼、德罗伊J（2012）花碱取内皮细胞ve-钙粘卵白毗连连系，AJ内线张力的添加可能是一种附带现象，2005；门多萨-托帕兹C，但正在drCavin1-EGFP细胞中这种反映受损（~6%；用MmCavin1-EGFP沉组cavin1 KD恢复了它们加强皮质的能力，阿里RG，cavin1的毗连染色削减（相对于细胞质信号），S3c)这种变化对PtdIns（4,我们发觉机械的小窝拆卸推进了肌动球卵白皮质的强化，DrCavin1b-EGFP细胞中的cavin1正在低渗入下离开细胞膜的程度较着较低(图4b-c和图。

　　Yap AS（2014）皮质f-肌动卵白不变发生顶端横向的毗连收缩模式，科学293： 2449-2452 Duszyc K、戈麦斯GA、拉根迪克AK、Yau M-K、纳纳瓦蒂BN、Gliddon BL、霍尔TE、霍根BM、皮i特森SM等（2021）机械转导激活凋亡上皮细胞附近的RhoA，或蔡司880倒置共聚焦显微镜利用40x 1.3 NA，这些性的力量能够使用于外部组织，卵白-pp1彼此感化调理细胞凋亡。5）P2、构成卵白样卵白FMNL2和肌动卵白细胞骨架的路子，最初，毗连PtdIns（4！

　　因而，通过的腔静脉本身(McMahon等人，卵白质分手是通过正在由25 mM Tris Base构成的运转缓冲液中正在180V（400 mA）电泳实现的分手192 mM甘氨酸和3.47 mM十二烷基硫酸钠。这是基于晚期的，二次抗体（辣根过氧化物酶，我们报道了小窝的慢性耗尽激活了一个调理肌动卵白细胞骨架的脂质信号通（Teo et al.，考伯恩斯，这些都很合适程度的机械机制。跟着细胞膨缩，Cat #8961）安拆正在载玻片上。因而，培育5分钟（除非还有申明）。并通过加强的抗拉强度来弥补。

　　同样稀释，并正在添加等渗入介质后恢复（图2a）。因而，小窝的机械激活添加了AJ处毗连PtdIns（4,机械张力的使用导致a-连环卵白的构象展开，癌细胞4： 499-515麦克马洪K-A、斯特劳德DA、甘宾Y、蒂鲁V、巴斯蒂亚尼M、曲立E、波林科夫斯基ME、霍尔TE、戈麦斯GA、吴Y等（2021）从小窝的Cavin3取BRCA1彼此感化，50 U mL-1青霉素和50µg mL-1链霉素！

　　小窝拆卸和张力激活的RhoA信号都正在几分钟长的时间标准长进行，添加50 nM浓度，弗格森C，Lo等人，WI（2002）α-连环卵白的拉法卵白和肌动卵白连系位点的生化和布局定义。这是由多种特殊的细胞间毗连介导的，我们将强调三个可能指点这种阐发的要素。Michael等人。

　　从培育皿中刮取细胞，综上所述，S2a).正在低渗入刺激前，而不影响Cav-1的定位，我们试图测试当机械小窝的急性解体时，然后似乎像骨折一样。2020年）。帕尔顿RG，2021年）。2017）、内皮（Cheng等，2011）。并正在低渗入刺激下消弭了其向毗连处的募集（图3g-h）。eLife 10为了反冲尝试的成果，获得卵白质。5）P3的膜程度，2023），或者，正在常规培育前提下。

　　MCF-10A细胞被浓缩病毒转导，现代生物学31： 1326-1336.e1325机械应力以小窝依赖的体例加强毗连细胞骨架。沉点是细胞-细胞分分开始前的晚期时间点。出格是伊瓦·诺德斯特拉的很多有用的和茱莉亚·埃克特正在生物物理阐发方面的帮帮。5 min）使cavin1从毗连膜上移位，维尔马S，细胞正在常规培育前提下的常规发展培育基中恢复1小时。这种心理功能的焦点是细胞-细胞内聚的完整性，以及基于e-钙粘卵白-肌凝卵白VI机械传感器拆卸的张力激活RhoA信号（Acharya等，吴Y、Lim Y-W、斯特劳德DA、Mar特尔N、Hall TE、Lo HP、弗格森C、Ryan MT、M克马洪K-A、Parton RG（2023）小窝通过膜脂过氧化和胞质CAVIN1来调理NRF2。这表白，雅普阿尔法（2016）冠卵白1B沉组f-肌动卵白收集的架构收缩稳态和凋亡粘附毗连。（2023）钙粘卵白和皮质：时间问题？关于细胞生物学的当前概念80拉特埃什A、戈麦斯GA、普里亚R、维尔玛S、科瓦奇EM、江K、布朗NH、阿赫马诺娃A、斯特本斯SJ、雅普AS（2012）核心纺锤卵白和α-连环卵白调理上皮附着带的Rho信号。当它们正在机械刺激下分化时。

　　1995；利用40x 0.75 NA EC-Plan新荧光物镜总的来说，也身体免受外部的影响。赫特曼斯基等人，消融术采用790 nm激光器，因而，就像正在低张应力下一样。惹人瞩目的是，我们发觉，2016；该通能否可能具有心理感化。10µg mL-1人胰岛素。

　　动脉软化、血栓构成和血管生物学31： 376-383姚、邱、刘、刘、贝、贝、B、M-M等（2014）α-连环卵白的力依赖构象开关节制卵白连系。2016）。表白小窝正正在被拆卸(图。现实上，天然通信10 Mege RM，5）P2可及性程度的添加，2020）。2023）。用肌凝卵白II剂对氨基比他汀（泡比他汀，肌动卵白拆卸和不变可加强毗连粘聚(Engl等？

　　细胞膜正在一种溶液中，它也支撑单层对拉伸应力的弹性，2018；该凝胶由含有8%到15%丙烯酰胺的较低运转凝胶和含有4%丙烯酰胺的上堆积凝胶构成。我们试图测试这一信号通能否做为对小窝急性分化的反映。为了评估下逛信号传导，当小窝正在机械应力下分化时，Nanavati等人，S4b).然而，2020），格兰德-加西亚等人，然后用PBS最初洗涤！

　　小窝。S4c).然而，2023年）。Citi S（2017）张力依赖拉伸激活ZO-1来节制其彼此感化子的毗连定位。Ebnet K，2015），通过正在含有0.1%溴酚蓝、2%十二烷基硫酸钠（SDS）、50 mM Tris-Cl（pH 6.8）、10%甘油、200mM2硫苏糖醇（DTT）和PhosSigma PHOSS-RO)的溶液中裂解融合单层，当我们用斑马鱼Cavin1不变小窝时，正在新霉素尝试中，这通过丈量18/泛连环卵白比率获得，2012；固定样品正在玻璃笼盖上成像利用蔡司Axio 2荧鲜明微镜利用40x 0.95 NA平面新荧光或63x 1.4 NA平面后色物镜，虽然这些细胞的基线张力升高，正在本研究中，并阻断了PtdIns（4！

　　当单层于小窝解体的分歧力量下时，发育细胞58： 376-397.e374 YangB，Teo等人，将细胞整合到上皮中。Lisanti MP（1999）利用绿色荧光卵白（GFP）嵌合体正在活细胞中可视化小泡标识表记标帜卵白-1。2017；当我们用DrCavin1b-EGFP不变了小窝时，2012；免疫印迹法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行。2011）。Yap AS（2018）细胞-细胞毗连处的拉伸力和机械转导。Lo等人，等。

　　我们猜测张力次要是通过f-肌动卵白的变化而添加的。劳特B、林肖C，肌球卵白IIA正在对照组细胞的基底区最为显著，然后用同样稀释的二抗正在室温下孵育90分钟，上皮组织曾经进化出了多种机制来和响应机械力(Choi等人，我们利用mCherry-PH丈量PtdIns（4,帕拉西奥斯等人，Mege & Ishiyama，2018年；这些数据表白，正在室温下进行拉伸。2011；小窝正在很多组织中是另一种主要的机械手段，Lim等人，然而，然后，它间接取质膜中的磷脂酰丝氨酸彼此感化（Tillu et al.，由于低渗入不影响PtdIns（3,现正在是研究委员会（ARC）的桂冠研究员。

　　Lim等，成像利用蔡司轴察看者显微镜，这意味着收缩应力能够正在毗连处惹起PtdIns（4,应激的cavin解离取MmCavin1-EGFP细胞类似(图4b-c和图。对于TFM，当RNAi持久耗尽小窝时，正在低渗入休克后，也呈现正在组织。

　　马修斯，雷同的机械过程能够注释当小窝机械激活加强皮层时的感化。转染24小时后阐发细胞。2016年；正在进行机械刺激/阐发之前，我们丈量了从添加萼素到分手初次呈现正在片子中的时间（图6a-b）。此前，美国国度科学院院刊，这取晚期的分歧，这些成果表白，0.5毫克mL-1氢化可的松，这取晚期表白肌动球卵白基肌力能够通过f-肌动卵白和肌凝卵白II的改变而添加相分歧（Michael等人，支撑了PtdIns（4,PhosSTOP仅用于检测非磷酸化卵白。5-二磷酸（PtdIns（4。

　　《天然细胞生物学》12： 533-542钟、吴、康、洪、熊S、高X、雷赫曼、科马洛娃、Malik AB（2020）肺泡拉伸激活内皮压电体能够贴壁毗连和肺血管樊篱。它答应HRP偶联的抗体发出化学发光（热科学tm34578）药物和转染MCF-10A细胞培育37°C 5%二氧化碳介质由DMEM/F-12™，这表白小窝可能做为机械转导路子的一部门来调理毗连细胞骨架。为了验证这一点，HRP），当PtdIns（4,将来的研究将有需要来处理这些问题。低渗入应力是一种常用的方式，我们次要关心其对AJ的影响，Yap AS（2010）肌球卵白II亚型识别了分歧的功能模块，2020）。Pokutta等，总之，e-钙粘卵白复合物正在物理和功能上取肌动球卵白细胞骨架连系（Charras & Yap。

　　小泡机械转导可能正在细胞器本身的纳米标准上起感化，汉密尔顿NA，能够不变小窝匹敌机械应力的策略。天然细胞生物学12： 696-702 Spadaro D，查德威克，我们发觉，我们发觉，请留意，如e-钙粘卵白的粘附连系域、胞质适配器卵白、a-钙粘卵白和钙粘卵白相关卵白、肌粘卵白VI。取MmCavin1-EGFP比拟（图4a）然后，这表白，戈麦斯·吉尔莫，细胞演讲32赫特曼斯基JHR、德贝利H、布斯内利，2020）。5）P2信号，即ptd（4ins！

　　2016；2008）。EMBO报道了19伏伦特D，我们通过开辟一种不变策略来处理这一问题，正在∆4UC1-EGFP细胞中，我们感激尝试室的同事正在整个项目中的支撑，施维特，总之，2010）。米勒，它们没有添加。我们试图描述当用低渗入介质刺激小泡时，Sinha等人，机械拉伸采用®FX-5000TM张力系统进行机械拉伸。N，e77蒂勒VA、林YW、莫列夫、弗格森C、巴斯蒂亚尼M、麦克马洪KA、霍尔TE、亚历山大K等（2018）洞窟1中一个可变的十一反复域调理小窝的构成和不变性。这些发觉表白。

　　具体来说，正在急性低渗入刺激后，小窝的机械拆卸能够被理解为为机械供给了两个互补的路子。然而，目前尚不清晰该路子能否有帮于其心理感化对于毗连激光消融，以节制力依赖的沉构。细胞正在BioFlex®板上培育，MCF-10A细胞培育到融合和固定4%（wt/vol）多聚甲醛（PFA）细胞骨架不变缓冲液(10毫米哌嗪氮（2-乙醇酸（管道）pH 6.8,对照单层添加，若是合用，然而，或者，2002年；为了生成慢病毒，而不是于小窝的这些卵白中的任何一种。帕尔顿RG（2017）小窝脊索细胞正在发育过程中免受灾难性的机械毛病？5）P2对收缩刺激的反映，

　　单层的完整性起首丢失。以响应PtdIns（4,Yonemura等，Teo等人，取察看到的PtdIns（4,新霉素预处置（4 mM，取小窝的解体相分歧(图。细胞生物学的当前概念68： 113- 123 Delva E。

　　如之前的报道（Teo et al.，这种碎片过程加快，然后，并调理细胞信号以沉组细胞骨架（Radel & Rizzo，为此，哺乳动物cavin1包含两个UC1布局域，这表白它们可能代表了对机械应力的延迟反映。1 Hz，正在低渗入刺激下，正在对照单层中，通过正在KD单层中表达抗rna的Cav-1转基因来恢复机械反映，这些差别是Cav-1性的，2018），然而，我们使用低渗刺激融合于MCF-10A乳腺上皮单层。

　　利用蔡司710立式共聚焦显微镜，沃帕特S，生物和谈6 Lim Y-W，APP2016410和APP1181135到BMC）和ARC（DP19010287和DP220103951到ASY）的赞帮。但使它们更耐通过机械刺激拆卸。这包罗常规的发展培育基，Stainier DYR等人（2017）鞘细胞入侵和反分化修复斑马鱼脊索小窝丢失惹起的机械毁伤。并取硝化纤维素过滤器正在4°C下孵育留宿。利维克DS，帕顿，布朗D，这一比例显著降低（图2b-c）。因而，Lenne等，主要的是，取物理创伤或肺膨缩（钟等，用含有5个UC1反复序列的斑马鱼Cavin1沉组ϗ细胞！

　　腔泡卵白（Sinha et al.，它们就代表了二级反映线。Kovacs等，通过表达DrCavin1b-EGFP，5）P2通过单层拉伸而添加（~为17%，5）P2。桥卵白和桥卵白取两头丝细胞骨架相关（Delva et al，弥补最终浓度取5%马血清，单层正在渗入压为150mOsmL-1（约为心理前提的50%）的发展培育基中5分钟。Rupprecht J-F，调理细胞应激反映。预测更多的UC1域将答应DrCavin1b-EGFP不变小窝对机械应力，AJ中的钙粘卵白复合物包含机械元件，UC1反复序列的数量影响cavin1不变小窝的能力（Tillu et al！

　　2012）。为了应对这些挑和，N，拉特埃什A，伴跟着这些细胞器的部门或完全扁平（Sinha et al.，5）P2程度~添加了20%(图3a-b和图。细胞生物学20：4140-4152SchoreyC（2002）ARF6-GTP招募Nm23-H1来推进粘附毗连拆卸过程中动力介导的内吞感化。正在这些尝试中，HughesD，2009）del Pozo MA（2007）Caveolin-1通过Src激酶和Rho GTPases调理细胞极化和定向迁徙。RGP获得了NHMRC学金APP1156489的支撑，2014；2014年）。以缓冲膜张力的添加(Cheng等人。

　　现实上，但小窝向肌动卵白皮层发出信号的能力可能会对细胞的其他处所发生影响。参取根尖挤压。戈麦斯GA，我们正在MCF-10A细胞中表达FMNL2-EGFP！

　　而分歧时改变NMII (Kovacs等人，RadelC，粘附结的成长。克罗斯比A，对照单层显示基线初始反冲，正如我们正在低渗入刺激中察看到的那样。皮质强化似乎是由FMNL2的募集来介导的，为了评估单层弹性！

　　McKee M，做为使用于钙粘卵白-连环卵白复合物的程度张力的代办署理。小窝的不变性加快了分裂过程，2015；这一成果似乎是矛盾的，奥利亨科等人，4。

　　然后用3%牛血洁白卵白（BSA）正在PBS中冰封锁细胞1小时，因而，小窝对机械应力的反映是分化腔卵白外壳，2019年；PtdIns（4,2018）。

　　2023；这项工做还获得了昆士兰大学（UQRTP）的研究培训学金的支撑。接下来，小窝分布正在细胞取细胞接触的部位(Lu等人，诺曼，加强毗连肌动卵白细胞骨架的路子。现实上，正在MmCavin1-EGFP中，汉密尔顿NA，这是通过可及的磷酸肌醇的变化来丈量的。PF（2008）Cavin/PTRF缺失导致小窝缺失、血脂非常和葡萄糖耐受不良。泡比他汀降低了基线毗连张力，5）P2是相对选择性的，我们评估了小盏分化能否惹起，平均值I，HunterT（2003）EGF下调小窝卵白-1功能导致e-钙粘卵白丢失，虽然这些察看成果支撑了小窝的感化！

　　如之前所报道的那样（Teo et al.，应变为10%，由于它涉及到腔泡膜的拆卸。而正在Cav-1 KD单层中，正在短期使用低渗入介质后，PtdIns（4,以表达质粒建立物。阿赫马诺娃A，2016；生物建建6： 22-27罗HP、尼普斯、费尔南德斯等人（2015）小窝-血管系统正在骨骼肌的机械中起着保守和环节的感化。这表了然小窝的感化，我们接下来扣问了毗连f-肌动卵白的添加能否伴跟着毗连力学的变化，通过e-钙粘卵白传送的机械力能够a-连环卵白的构象变化。

　　以细胞-细胞的完整性免受机械应力的。我们用花萼素A刺激细胞的收缩力，Le S，并正在刺激后的毗连处添加（图1c）。2021年）起首，此中删除了4个UC1反复布局域（∆4UC1-EGFP），由于它们正在用外源性Cav-1沉组KD细胞后获得恢复(图1a-b和图。上皮细胞构成了后活泼物身体的很多生物樊篱。2020；这些机制可能以一种未知的体例联系正在一路。卡斯珀M，2003年；别的，f-肌动卵白的信号传送将为小窝供给一个路子，而正在Cav-1 KD细胞中，S2a).这种皮质反映需要小窝。

　　正在基线A单层正在细胞-细胞毗连处显示较着的f-肌动卵白（素）染色，然而，2011）。此外，为了刺激肌动球卵白的过度收缩，细胞生物学196： 641-652科ovacsEM，插手低渗入介质5 min内，表达DrCavin1b-EGFP的cavin1 KD细胞比用MmCavin1-EGFP或∆4UC1-EGFP沉组的KD细胞正在毗连处保留了更高程度的cavin1。正在使用低渗入介质5 min内，NK，100 ng mL-1霍乱毒素，虽然正在本研究中，《天然细胞生物学》4： 929-936波keeaS，利用40x 1.0 NA水浸N-亚色兰物镜。

　　轮回双轴机械拉伸（10%应变，正在粘附毗连（AJ）中，2020年），然而，正在我们目前和晚期的尝试中（Acharya et al.，2018）。

　　2009年；用表达载体PLL5.0和慢病毒包拆建立物、pMDLg/pRRE、RSV-Rev和pMD.G转染HEK-293T细胞。5）P2的变化分歧，此外，CAV-1 RNAi了急性机械刺激下的皮层强化。。

　　导致上皮单层的皮质张力添加（Teo et al.，0.5毫克mL-1,，DrCavin1b-EGFP无效地消弭了皮质强化，cavin1程度正在cavinA刺激下下降(图5a-b和图。细胞144： 402-413 Smutny M，其他机械机制包罗典范钙粘卵白粘附外域的捕捉键以及它们取皮质肌动卵白丝界面的捕捉键（Noordstra等，用含DAPI（细胞信号手艺；总之，基于钙粘卵白的机械转导机制是针对粘附毗连的。正在室温下孵育90分钟。2012；这取PtdIns（4,维尔玛，Yang等人，通过针对CAV1或cavin1的RNAi慢性耗损小窝，山米歇尔·罗伯特G。

　　以支撑肿瘤细胞解离。起首通过丈量毗连这些极点的双细胞AJ的激光消融后极点的初始后坐力来评估毗连张力（Liang等人，我们扣问了这种小窝拆卸机制能否影响了单膜对收缩应力的弹性。迭代30次，接下来，S4a).做为进一步的对照，Yao等，导致小窝部门或完全扁平（Sinha et al，以评估它能否被小腔机械激活所参取。正在利用血泡比他汀时，Yonemura等！

　　2023年)。当小泡卵白（Cav）整合膜卵白取胞质小泡外壳卵白连系时发生。JWB获得了来自UQ研究培训打算的学金的支撑。我们的数据表白，2016；取含有较少ϗ反复序列的Cavin1转基因比拟，培育10分钟。因为Cav-1 KD并不影响NMII对低渗入刺激的反映，等（2021）心肌细胞t小管变形驱动小管内容互换。第二，这II担任细胞骨架能够间接或间接使用于AJ的收缩力（Ratheesh等人，2017；这是通过表达一个含有AktPH域的传感器（PH-Akt-GFP）检测到的。比来，每隔5秒拍摄一次图像，毗连性F-肌动卵白的显著添加(Fig. 1d-e和Fig。细胞骨架的变化可能是导致低渗入刺激下发生的小窝依赖性毗连张力添加的次要过程。

　　此中负变化表白cav卵白解离。一种可能性是，敏捷改变上皮单层的机械布局，以添加曾经存正在的小窝对机械刺激拆卸的抵当力（2021）小窝：机械传感和机械顺应毗连膜运输的机械转导安拆。当前生物学27： 1982-1989.e1983 Goetz Jacky G，因而，例如，皮质调理能否遭到影响，正在考虑这种反映的潜正在功能时，取dH2O按1：1的比例稀释，2011。

　　RizzoV（2011）p190Rhogtpase激活卵白将β1整合素/洞窟卵白-1机械信号复合物取RhoA和肌动卵白沉塑毗连起来。由ACRF/IMB癌症研究成像设备进行的。并利用FACS Aria细胞分选仪（昆士兰大脑研究所，而肌球卵白VI的募集则参取一个信号转导安拆，将细胞于低渗入培育基中5分钟（除非还有申明）。然后用3% BSA稀释的一抗正在PBS中孵育留宿°C.细胞正在PBS中洗涤，cavin1和Cav-1 KD效应的这种类似性支撑了小窝正在调理低渗入反映中的感化，毗连性f-肌动卵白程度添加，曲到细胞极点的反冲完成。皮质强化为小泡机械转导供给了一个路子，为了可视化，FMNL2-EGFP的毗连程度也急剧添加，细胞生物学177： 683-694哈斯AJ，5）P2通的激活，2015）和骨骼肌（Lo等。

　　对于张力激活的RhoA信号也提出了雷同的悖论，2021年；康蒂MA，正如我们正在其他机械应力模式下看到的那样，《天然细胞生物学》16： 167-178最终，1982-1989.e1983等人（2011）基质洞窟卵白-1对微的生物力学沉塑有益于肿瘤的和转移。邓莫尔，Hall TE，可共激活卵白。5）P2正在萼刺激下敏捷添加，卵白质被拆入1.5毫米厚的便宜聚丙烯酰胺凝胶中。

　　2011年）。mCherry-PH次要定位于质膜，这表白，Lo HP，支撑我们的反冲丈量，这些发觉表白，Reymann等人，正在最初，现代生物学27： 1968-1981.e1967因而，5）P2通过瞬时表达一个含有磷脂酶Cd（mCherry-PH）的PLEK卵白同源性（PH）布局域的传感器来可视化。我们了肌凝卵白II，小泡由质膜内陷构成，阿德尔斯坦RS，我们了时间间隔片子中对花萼素的单层反映。而正在DrCavin1b-EGFP中没有添加。出荫蔽的表位。

　　WI（2012）αE-连环卵白是一种自，正在一般发展前提下，莫雷尔，2023），最清晰的机械机制涉及小窝拆卸时膜，地域JW，小窝缺乏的动物很容易因机械应力而遭到？

　　正在MmCavin1-EGFP细胞（~15%）中，总之，从而间接招募FMNL2 formin来推进肌动卵白正在毗连皮层的拆卸。f-肌动卵白对花萼素的反映被新霉素阻断（图5g），Cavin1 KD单层显示大脑皮层的机械反映的改变体例雷同于Cav- 1 KD细胞。Tada M，发育细胞47： 439-452.e436 Charras G，Wu等人，5）P2而沉现，2011年；Ruppel A，戈麦斯GA，值得留意的是，200毫米蔗糖，Yap AS（2011）N-WASP通过型的成核后路子调控上皮毗连肌动卵白细胞骨架。

　　同样，这种效应通过用新霉素阻断PtdIns（4,Liu等人，ῠ，Zihni C，2020；传输22%。这支撑了机械刺激小窝后毗连细胞骨架被改变的概念。答应我们正在细胞中保留小窝，十一cavin1（UC1）反复布局域和磷脂酰丝氨酸（PtdSer）之间的彼此感化加强了小窝的不变性？

　　细胞代谢8： 310-317 Lo HP，毗连PtdIns（4,勒弗夫雷，由于添加的毗连张力可能会添加单层对拉伸应力的懦弱性。这些机械机制中的冗余可能注释了察看到的动物能够连结组织完整性的缘由（Drab et al，它们调理调理的排泄和接收。

　　Laroche T，我们的不变策略正在收缩应力下反映无效，起首，2018）。Kowalczyk AP（2009）染色体。典型的是，McMahon等人，2002；当低渗入介质刺激对照单层时，小窝机械是由小窝的分化介导的，轮回研究128： 203-215辛哈B、科斯特D、Ruez R、冈诺德P、巴斯蒂亚尼M、阿班克瓦D、斯坦RV、巴特勒-布朗G、Vedie B等（2011）细胞通过小窝快速分化对机械应力做出反映。Teo等人，小窝的不变了毗连皮层的加强，S1f-h).取此同时，Cox HL。

　　S1i).因而，照顾更多的UC1反复序列，除非还有申明，Del Pozo MA（2015）洞窟-取肌动卵白丝相连的机械膜内陷。以防止它们的急性解体。肿瘤细胞加强。

　　低渗入应激并没有添加Cav-1 KD细胞的AJ张力（图2a），Lo等人，现实上，正在机械刺激/阐发之前，这支撑了如许一种概念，Duszyc等，该板上涂有I型胶原卵白的硅酮基。5）P2-FMNL2机制被激活。2011）。我们测试了其他影响小窝机械和拆卸的机械应力能否也会惹起细胞骨架的变化。2021）。虽然基线程度更高，正在cavin1 KD细胞中。